En el 2009, BioMar Chile y Marine Harvest Chile se propusieron realizar una completa investigación conjunta que permitiera obtener más antecedentes acerca de si el reemplazo de materias primas marinas por vegetales en la dieta para peces tenía efectos en la respuesta inmune del salmón Atlántico (Salmo salar).

Para lograr lo anterior, se determinó realizar la investigación sobre post-smolt, etapa de vida crítica del pez donde el alimento es un factor determinante. Además, con el objetivo de cubrir los distintos aspectos que pudieran evidenciar los efectos de las dietas sobre la capacidad inmunológica de los peces, se definió que se analizarían los siguientes aspectos: parámetros productivos (FCR, SGR o crecimiento, y mortalidad), respuesta inmune por medio de la expresión

de genes (incluyó análisis por medio de microarreglos sobre tejido hepático y ocho genes específicos a través de RT-PCR en hígado y riñón), análisis patológico, histopatología, índices somáticos de diferentes órganos y, finalmente, se desafió a los peces contra SRS.

Es importante destacar que con la idea de entregar independencia a los resultados, se decidió efectuar la investigación en los laboratorios de SGS Aquatic Health Chile y se contrataron los servicios de AVS Chile, quienes estuvieron involucrados tanto en el diseño de la prueba, como en la toma y análisis de muestras y resultados.

Características de la investigación

Para esta prueba se utilizaron cuatro tipos de dietas, las cuales incluyeron la combinación de distintos orígenes para las fuentes principales de proteína y lípidos, es decir, proteínas y lípidos de origen marino, y proteínas y lípidos de origen vegetal (ver Cuadro 1). Las dietas fueron formuladas de forma iso-proteicas e iso-energéticas y siempre se cuidó de mantener el perfil nutricional de estas.

Las dietas fueron entregadas a estanques en triplicado durante 68 días y donde los peces alcanzaron una talla final promedio de 230 g. Las condiciones de cultivo promedio durante la prueba fueron: temperatura de 10°C, salinidad de 27,6% y nivel de oxigenación del 81%. Asimismo, hay que consignar que la alimentación fue a saciedad y que la investigación se realizó entre el 15 de mayo y el 21 de julio del año pasado.

Resultados

Respecto de los parámetros productivos (ver Cuadro 2), es posible apreciar resultados levemente mejores en crecimiento con la dieta que tenía una mayor composición marina (MP/Fo), sin embargo, en FCR los resultados son positivos para la dieta con mayor reemplazo, lo que indica que estos datos podrían estar afectados por las prácticas de alimentación a los que fueron sometidos. De todas formas, las diferencias existentes entre los cuatro tipos de dietas no son relevantes.

En cuanto a la evaluación patológica, ésta fue realizada por medio del sistema puntajes (modificado Adams et al 1993) asignados en la evaluación interna y externa durante la necropsia de los peces. En general, los resultados muestran peces con buenas condiciones sanitarias sin diferencias entre los tratamientos (ver Cuadro 3). Si bien se apreció una mejor condición de los ejemplares al inicio de los tratamientos, esto está asociado principalmente al estado de las aletas producto de las altas densidades. Respecto a los índices somáticos, no se encontraron diferencias en los órganos analizados (corazón, hígado e intestinos).

En relación con la expresión de genes vinculados con la capacidad inmunológica de los peces en los tratamientos extremos (MP/Fo y RP/vo), la información obtenida desde los microarreglos indica que no existen importantes diferencias entre las cuatro dietas, ya que de los 1.800 genes incluidos (estrés y respuesta inmune), sólo 20 fueron regulados de forma positiva o negativa, siendo algunos de estos esperados, como, por ejemplo, genes asociados a la respiración mitocondrial (+RP/vo). Por otro lado, se observó una regulación positiva en el tratamiento MP/Fo de un componente del sistema inmune innato (complemento).

Adicionalmente, la expresión medida por la técnica de RT-PCR (qPCR) en hígado y riñón de genes específicos que representan un amplio espectro de mediadores de la respuesta inmune innata y adquirida, confirmó los resultados entregados por los microarreglos respecto a la baja incidencia de las dietas en la regulación de estos genes, con dos excepciones –ambas reducciones– relativas al tratamiento RP/vo respecto a MP/Fo: el Cd8 Linfocitos T analizado en el hígado, el cual podría estar asociado a un mayor número de estas células circulando en el sistema en la dieta MP/Fo y, por otro lado, PdGS (enzima asociada a la síntesis de prostaglandina) en riñón anterior, resultado que no es el esperado para la dieta con mayores niveles de ácidos grasos omega-3 (MP/Fo). A pesar de lo anterior, al observar otros mediadores de inflamación como, por ejemplo, iL-6 vemos que no se aprecian diferencias entre las dietas (ver Cuadro 4).

En tanto, la examinación histopatológica (a través de muestras “ciegas” por la misma persona) no reveló cambios clínicos significativos en el hígado, corazón e intestino. En este último caso, se observaron en baja incidencia efectos en el intestino distal, no siendo exclusivos de un tratamiento en particular o que indicaran una tendencia entre las dietas.

Mortalidad y SRS

Finalmente, con el objetivo de evaluar si las diferencias generadas en los peces durante el periodo de alimentación por los distintos tratamientos pudieran expresarse en diferencias en mortalidades frente a una enfermedad, los peces fueron desafiados contra SRS (Piscirickettsia salmonis), registrándose la mortalidad por 30 días después del desafío. Al cabo de este período, no se observaron diferencias significativas en la mortalidad acumulada entre los cuatro grupos (ver Cuadro 5).

Con todo lo anterior, se puede concluir que esta investigación no evidenció efectos significativos que pudieran tener los cuatro tipos de dietas, tanto en los factores productivos (crecimiento y FCR) como en el status sanitario y respuesta inmunológica sin ser posible, además, identificar una tendencia hacia el reemplazo de las proteínas o fuentes lipídicas en post-smolt de salmón Atlántico.